第一部分GPC4在小鼠脂肪中的表達(dá)及GPC4過表達(dá)質(zhì)粒和shRNA的構(gòu)建目的:檢測GPC4在小鼠脂肪中的表達(dá)情況,構(gòu)建基于小鼠GPC4基因的過表達(dá)質(zhì)粒及sh-RNA抑制質(zhì)粒,為進(jìn)一步研究GPC4在脂肪轉(zhuǎn)化中的作用提供基礎(chǔ)。方法:采用Western blot檢測C57BL/6J小鼠的iWAT,eWAT及BAT中GPC4的蛋白表達(dá)量。設(shè)計(jì)小鼠GPC4的引物,利用載體pcDNA3.1(+)構(gòu)建GPC4過表達(dá)質(zhì)粒;設(shè)計(jì)小鼠GPC4抑制質(zhì)粒引物,構(gòu)建GPC4的抑制質(zhì)粒。成功的誘導(dǎo)分化3T3-L1前脂肪細(xì)胞后,轉(zhuǎn)染GPC4過表達(dá)質(zhì)粒及抑制質(zhì)粒后,用RT-QPCR及Western blot檢測GPC4mRNA及蛋白的表達(dá)量。結(jié)果:GPC4在iWAT顯著高于eWAT及BAT(P<0.001);GPC4過表達(dá)質(zhì)粒測序結(jié)果顯示與GPC4相符;GPC4在3T3-L1細(xì)胞過表達(dá)后,GPC4的mRNA及蛋白的表達(dá)量顯著增高(P<0.001);GPC4在3T3-L1細(xì)胞抑制后,GPC4的mRNA及蛋白的表達(dá)量顯著降低(P<0.001)。結(jié)論:GPC4可能與白色脂肪的褐變相關(guān),GPC4過表達(dá)質(zhì)粒及抑...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 GPC4 在小鼠脂肪中的表達(dá)及GPC4 過表達(dá)和shRNA載體的構(gòu)建
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
第二部分 脂肪細(xì)胞中GPC4 促進(jìn)白色脂肪褐變
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
第三部分 GPC4 通過與RAPTOR相互作用促進(jìn)褐變
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：4050830