GPR119/MST1/FoxO1通路在鼠胰腺β細(xì)胞脂毒性損傷中的作用研究
發(fā)布時間:2025-06-19 23:28
研究目的證實脂毒背景下鼠胰腺β細(xì)胞膜G蛋白偶聯(lián)受體119(GPR119)通過Ca2+-CaM活化MST1-FoxO1通路引起細(xì)胞功能損傷的途徑和機制。研究方法1.經(jīng)棕櫚酸(PA)孵育大鼠胰島素瘤細(xì)胞株INS-1,采用MTT實驗檢測INS-1細(xì)胞存活率;采用蛋白免疫印跡實驗(Western Blotting,WB)證實PA對Caspase-3及clCaspase-3的表達(dá)調(diào)節(jié)作用。2.GPR119激動劑MBX孵育INS-1細(xì)胞,通過MTT實驗檢測細(xì)胞存活率;運用流式細(xì)胞術(shù)檢測INS-1細(xì)胞的凋亡率和鈣離子濃度的變化;運用細(xì)胞免疫化學(xué)法鑒定GPR119的分布及表達(dá);運用WB檢測GPR119,phospho-MST1,clMST1,MST1,phospho-FoxO1,FoxO1,Caspase-3,clC3 及 Pdx1 的表達(dá)水平;運用qPCR檢測BCL-2,Bax,Pdx1及Insulin的mRNA表達(dá);運用酶比色法檢測INS-1細(xì)胞內(nèi)甘油三酯、游離脂肪酸及胰島素的含量。3.Ca2+螯合劑EGTA和CaM抑制劑CPZ孵育INS-1細(xì)胞,通過MTT實驗檢測細(xì)胞存活率;運用流式細(xì)胞術(shù)檢測IN...
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:4051085
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圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗
圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗圖2.PA(500uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<
圖2.PA(500uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)
圖2.PA(500uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)圖3.PA(250uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)
圖3.PA(250uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)
圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗圖2.PA(500uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.0
圖4.MTT檢測GPR119激動劑MBX對INS-1細(xì)胞的毒性實驗
.PA(500uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響.PA(250uM/L)不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響
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