研究目的證實脂毒背景下鼠胰腺β細(xì)胞膜G蛋白偶聯(lián)受體119(GPR119)通過Ca2+-CaM活化MST1-FoxO1通路引起細(xì)胞功能損傷的途徑和機制。研究方法1.經(jīng)棕櫚酸(PA)孵育大鼠胰島素瘤細(xì)胞株INS-1,采用MTT實驗檢測INS-1細(xì)胞存活率;采用蛋白免疫印跡實驗(Western Blotting,WB)證實PA對Caspase-3及clCaspase-3的表達(dá)調(diào)節(jié)作用。2.GPR119激動劑MBX孵育INS-1細(xì)胞,通過MTT實驗檢測細(xì)胞存活率;運用流式細(xì)胞術(shù)檢測INS-1細(xì)胞的凋亡率和鈣離子濃度的變化;運用細(xì)胞免疫化學(xué)法鑒定GPR119的分布及表達(dá);運用WB檢測GPR119,phospho-MST1,clMST1,MST1,phospho-FoxO1,FoxO1,Caspase-3,clC3 及 Pdx1 的表達(dá)水平;運用qPCR檢測BCL-2,Bax,Pdx1及Insulin的mRNA表達(dá);運用酶比色法檢測INS-1細(xì)胞內(nèi)甘油三酯、游離脂肪酸及胰島素的含量。3.Ca2+螯合劑EGTA和CaM抑制劑CPZ孵育INS-1細(xì)胞,通過MTT實驗檢測細(xì)胞存活率;運用流式細(xì)胞術(shù)檢測IN...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗

圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗圖2.PA（500uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<

圖2.PA（500uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)

圖2.PA（500uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)圖3.PA（250uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)

圖3.PA（250uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.05)

圖1.MTT檢測PA對INS-1細(xì)胞的毒性實驗圖2.PA（500uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響(*P<0.0

圖4.MTT檢測GPR119激動劑MBX對INS-1細(xì)胞的毒性實驗

.PA（500uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響.PA（250uM/L）不同干預(yù)時間對INS-1細(xì)胞Caspase-3表達(dá)的影響

本文編號：4051085