目的研究不同碘攝入量對大鼠甲狀腺功能、鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)基因啟動(dòng)子區(qū)5′-CpG島甲基化的影響,探討碘是否通過調(diào)節(jié)NIS基因甲基化的途徑來影響NIS的表達(dá)。方法將40只雌性SD大鼠分入5組(每組8只),分別給予低碘(LI組)、適碘(NI組)、5倍高碘(5HI組)、10倍高碘(10HI組)、20倍高碘(20HI組)飲食構(gòu)建大鼠模型。3個(gè)月后處死動(dòng)物,采用化學(xué)發(fā)光法測定大鼠血清游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)水平,免疫組化檢測NIS表達(dá),并應(yīng)用硫化測序PCR(BSP)檢測每組大鼠甲狀腺細(xì)胞NIS基因啟動(dòng)子區(qū)5′-CpG島甲基化情況。結(jié)果①與適碘組比較,低碘組和各高碘組血清FT3濃度均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與適碘組比較,低碘組和各高碘組血清FT4略增高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);各組大鼠的血清TSH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。②LI組大鼠甲狀腺組織中NIS表達(dá)水平高于NI組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),5HI組NIS表達(dá)水平低于NI組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),1...

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圖2 各組大鼠甲狀腺組織中NIS蛋白表達(dá)量

圖1大鼠甲狀腺中NIS表達(dá)水平DAB染色×4003討論

圖1 大鼠甲狀腺中NIS表達(dá)水平 DAB染色×400

表2各組NIS基因CpG島甲基化情況(n=3)項(xiàng)目LI組NI組5HI組10HI組20HI組CpG1甲基化比率[m/M(%)]9/80(11.25)9/80(11.25)12/80(14.58)10/80(12.5)10/80(12.5)CpG2甲基化比....

圖3 NIS基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島分析結(jié)果

人NIS(hNIS)又稱SLC5A5(solutecarrierfamily5member5),基因位于19號(hào)染色體(19p13.11)上,高度專一且有效地編碼80～90ku跨膜糖蛋白,介導(dǎo)碘從血流到甲狀腺濾泡細(xì)胞的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。此運(yùn)輸通過Na+/K+-ATPase泵產(chǎn)生....

圖1 大鼠甲狀腺中NIS表達(dá)水平DAB染色×400

隨機(jī)從五組大鼠甲狀腺組織中各選取兩個(gè)組織標(biāo)本,用免疫組化方法檢測NIS蛋白表達(dá)水平,如圖1所示,蘇木精復(fù)染細(xì)胞核后,細(xì)胞核被染上藍(lán)色,各組細(xì)胞膜呈現(xiàn)棕黃色,陽性信號(hào)強(qiáng)度不同;陰性對照組胞膜不被DAB染色。并通過ImageProPlus圖像分析軟件分析累積光密度值,與NI組比較....

本文編號(hào)：4050612