韭菜遲眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga)是危害韭菜等百合科蔬菜的一種重要害蟲,可導(dǎo)致韭菜大量減產(chǎn)。性別決定與分化是影響韭菜遲眼蕈蚊生殖、發(fā)育和種群結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵因素,doublesex(dsx)基因是控制昆蟲性別分化的關(guān)鍵基因。但迄今為止對(duì)于韭菜遲眼蕈蚊dsx還沒有相關(guān)報(bào)道。為了研究韭菜遲眼蕈蚊的性別決定基因dsx,我們基于韭菜遲眼蕈蚊轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),比對(duì)到Bodsx相關(guān)片段,采用RT-PCR與RACE方法克隆出Bodsx基因,利用生物信息軟件對(duì)所得到的序列進(jìn)行結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)、氨基酸序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育分析。采用定量PCR方法研究了dsx基因在韭菜遲眼蕈蚊不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況。采用RNAi技術(shù)初步研究了dsx基因在韭菜遲眼蕈蚊體細(xì)胞性別決定中的作用。具體結(jié)論如下:1.克隆了韭菜遲眼蕈蚊的Bodsx基因,擴(kuò)增出4條序列,包括6個(gè)外顯子,其中2個(gè)剪切體分別是非性特異性剪切體。預(yù)測(cè)了韭菜遲眼蕈蚊dsx蛋白,分為雌性特異性蛋白BoDSXF和雄性特異性蛋白BoDSXM。發(fā)現(xiàn)BoDSX具有保守的OD1與OD2結(jié)構(gòu)域,這2個(gè)結(jié)構(gòu)域主要參與DNA與蛋白質(zhì)的相互作用。發(fā)現(xiàn)了Bodsx具有雙翅目昆蟲dsx...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1昆蟲遺傳型性別決定模式圖（Verhulstetal.,2015）

圖1昆蟲遺傳型性別決定模式圖（Verhulstetal.,2015）Fig.1Theinsectgenotypesexdeterminationpattern（Verhulstetal.,2015）Y、XX/XO和2n/1n分別代表不同染色體性別決....

圖2韭菜遲眼蕈蚊Bodsx剪切體的分子結(jié)構(gòu)

Exon5（352bp）和一個(gè)Exon6（1141bp）的外顯子（圖2），分別命名為外顯子E2、E3、E4、E5和E6。其中外顯子E4沒有擴(kuò)增到polyA，但是擴(kuò)增到了終止密碼子TGA。初步判斷Bodsx基因由6個(gè)外顯子組成：E1、E2、E3、E4....

圖3韭菜遲眼蕈蚊Bodsx的保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)圖

3.2.2Bodsx的保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)預(yù)測(cè)了Bodsx的保守結(jié)構(gòu)域，發(fā)現(xiàn)韭菜遲眼蕈蚊Bodsx4個(gè)剪切體都有OD1結(jié)構(gòu)域，其中2個(gè)剪切體還含有OD2結(jié)構(gòu)域（圖3）。通過(guò)與已報(bào)道的在dsx基因上發(fā)現(xiàn)的保守序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)，韭菜遲眼蕈蚊Bodsx除了OD1和OD2結(jié)構(gòu)域外，還有昆蟲d....

圖4韭菜遲眼蕈蚊和黑腹果蠅等DSX蛋白的多重序列比對(duì)Fig.4PeptidealignmentofD.melanogaster,An.gambiae,S.ocellarisandB.odoriphagadoublesexgenesdsx基因的蛋白序列被分為三個(gè)部分:共同區(qū)域（雌雄共同區(qū)域）；雌性特異性區(qū)域；雄性特異性區(qū)域

圖4韭菜遲眼蕈蚊和黑腹果蠅等DSX蛋白的多重序列比對(duì)Fig.4PeptidealignmentofD.melanogaster,An.gambiae,S.ocellarisandB.odoriphagadoublesexgenesdsx基因的蛋....

本文編號(hào)：4057040