目的:1、探討紅霉素通過抑制氧化應(yīng)激對煙草煙霧暴露下人巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。2、探討紅霉素對煙草煙霧暴露下人巨噬細(xì)胞PPARγ表達(dá)的影響。方法:選取人單核細(xì)胞系U937細(xì)胞,用終濃度為200ng/ml的佛波酯孵育24h后將其誘導(dǎo)為人巨噬細(xì)胞,以人巨噬細(xì)胞為研究對象。用細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒(CCK8)檢測煙草煙霧提取物(0.1、1、2、3%CSE)、紅霉素(0.1、1、10、100ug/ml EM)對細(xì)胞增殖活性的影響。細(xì)胞分組及處理:對照組、CSE組(細(xì)胞在含1%CSE培養(yǎng)基中孵育24h)、CSE+EM組(細(xì)胞在含有1ug/ml EM的培養(yǎng)基中預(yù)孵育24h,再在含1%CSE的培養(yǎng)基中孵育24h),PPARγ抑制劑GW9662組(細(xì)胞在含10umol/ml GW9662的培養(yǎng)基中孵育24h);用熒光顯微鏡及熒光酶標(biāo)儀觀察和檢測活性氧ROS的釋放水平;用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測炎癥因子IL-6和IL-8的釋放水平;用Western blot法檢測各組細(xì)胞蛋白中PPARγ和NF-κB p65蛋白表達(dá)水平;用RT-PCR法檢測各組細(xì)胞PPARγ和NF-κB p65 mRNA的相對表...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1PMA誘導(dǎo)U937細(xì)胞為人巨噬細(xì)胞（A:誘導(dǎo)前，B:誘導(dǎo)24h后）400X

草煙霧暴露下人巨噬細(xì)胞過氧化物酶體增生物激活受體γ（PPARγ）的影響2015級碩士學(xué)位論結(jié)果37細(xì)胞誘導(dǎo)分化為人巨噬細(xì)胞實(shí)驗(yàn)選用單核細(xì)胞系人淋巴瘤來源單核細(xì)胞系U937細(xì)胞，該細(xì)下觀察可見細(xì)胞和細(xì)胞核呈圓形，細(xì)胞邊緣透亮，表明細(xì)胞生。經(jīng)200ng/ml佛波酯孵育....

圖1-2不同濃度的CSE對人巨噬細(xì)胞增殖活性的影響

煙霧暴露下人巨噬細(xì)胞過氧化物酶體增生物激活受體γ（PPARγ）的影響2015級碩士學(xué)位論

圖1-3不同濃度的紅霉素對人巨噬細(xì)胞增殖的影響

圖1-2不同濃度的CSE對人巨噬細(xì)胞增殖活性的影響ctsofdifferentconcentrationsofCSEonmacrophagegrowthatdifferenttimepoints

圖1-4DCFH-DA法熒光顯微鏡顯微鏡觀察各組ROS釋放（A：對照組，B：CSE組，C：CSE+紅霉素組，D：GW9662組）200X

下人巨噬細(xì)胞過氧化物酶體增生物激活受體γ（PPARγ）的影響2015級鏡觀察煙草煙霧暴露下人巨噬細(xì)胞ROS釋放水平：示，與對照組比較，1%CSE能促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)ROS的釋+EM組經(jīng)1ug/ml紅霉素預(yù)孵育24h后，ROS釋放PARγ抑制劑GW96....

本文編號：4055212