研究背景作為一種輔助治療措施,極化液“葡萄糖-胰島素-鉀”(GIK)用于急性心肌梗死(AMI)和心臟外科手術(shù)的臨床治療已有50多年的歷史,但其療效一直存在爭議。對這些臨床試驗(yàn)的研究結(jié)果進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),GIK治療組患者血糖顯著升高可能是導(dǎo)致試驗(yàn)出現(xiàn)陰性結(jié)果的重要原因之一。我們實(shí)驗(yàn)室的研究發(fā)現(xiàn),高血糖可加重大鼠和犬心肌缺血/再灌注損傷,且明顯減弱GIK對缺血/再灌注心肌的保護(hù)作用。這些結(jié)果提示,良好的血糖控制是GIK臨床應(yīng)用的重要前提,但是高血糖減弱GIK心肌保護(hù)作用的機(jī)制尚不清楚。我們前期研究發(fā)現(xiàn),胰島素是GIK發(fā)揮心肌保護(hù)作用的關(guān)鍵成分;胰島素可通過結(jié)合胰島素受體(IR)促進(jìn)胰島素受體底物-1(IRS-1)酪氨酸磷酸化,激活3-磷脂酰肌醇激酶-蛋白激酶B-內(nèi)皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-e NOS)途徑抑制缺血/再灌注心肌細(xì)胞凋亡、促進(jìn)心肌生存,防治遲發(fā)性心肌梗死。據(jù)此提出胰島素直接激活細(xì)胞“生存信號(survival signal)”的細(xì)胞保護(hù)新機(jī)制。另一方面,近年的研究顯示高血糖對細(xì)胞的損傷作用與葡萄糖的已糖胺生物合成通路(HBP)密切相關(guān)。尿嘧啶-5’-二磷酸-N-乙酰葡萄糖胺...

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【學(xué)位級別】：博士

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中文摘要
ABSTRACT
前言
文獻(xiàn)回顧
實(shí)驗(yàn)一 高糖對胰島素的心肌保護(hù)作用的影響及其機(jī)制：糖基化修飾的關(guān)鍵作用
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 乳鼠心肌原代細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 建立乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型
        2.3 實(shí)驗(yàn)方案（附圖）
        2.4 細(xì)胞活性的檢測
        2.5 LDH活性檢測
        2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率
        2.7 細(xì)胞蛋白提取及BCA蛋白定量
        2.8 Western Blot
        2.9 免疫沉淀法（IP）
        2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 分離的原代SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞
        3.2 心肌細(xì)胞生存率和LDH的釋放
        3.3 心肌細(xì)胞凋亡
        3.4 心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)總O-GlcNAc糖基化修飾水平
        3.5 心肌細(xì)胞IRS-1 O-GlcNAc糖基化修飾水平
        3.6 心肌細(xì)胞IRS-1、Akt磷酸化水平
        3.7 DON抑制心肌細(xì)胞胰島素生存信號通路的O-GlcNAc糖基化修飾
        3.8 DON對高糖減弱胰島素心肌保護(hù)作用的影響
    4 討論
實(shí)驗(yàn)二 體外循環(huán)心臟手術(shù)中高血糖對GIK心肌保護(hù)作用的影響及其機(jī)制研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)對象
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 麻醉與體外循環(huán)
        2.2 研究分組
        2.3 心肌酶CK-MB的檢測
        2.4 肌鈣蛋白I（cTnI）的檢測
        2.5 組織蛋白提取及BCA蛋白定量
        2.6 Western Blot
        2.7 免疫沉淀法（IP）
        2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 各組血糖濃度變化
        3.2 心肌酶CK-MB的水平
        3.3 肌鈣蛋白cTnI的水平
        3.4 心肌組織總O-GlcNAc糖基化水平
        3.5 心肌組織IRS-1、Akt O-GlcNAc糖基化水平
        3.6 心肌組織IRS-I、Akt磷酸化水平
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號：4052977